تقنية “ western blot “ أحد التقنيات المستخدمة في لابات المناعة
- ثريد بسيط عنها
هي تقنية تستخدم لتحديد بروتين معين من كل البروتينات الموجوده في العينة حيث يستخدم الاجسام المضادة للكشف عن البروتين عن طريق التلوين المناعي ، سميت بهذا الاسم نسبه إلى العالم الذي اكتشفها
تستخدم الاجسام المضادة ك “ props” للبروتين المراد عزله
- لها عدة خطوات وهي :
1- Sample preparation
2- Elctrophoresis “ SDS-Page “
3- Transfer
4- Blocking
5- Detection
6- analysis
1- sample preparation:
يستخلص البروتين من عينات كثيره ولكن الاهم بعد الاستخلاص يُعرف تركيز البروتين في خطوه تسمى “ protein Estimation “ حتى يتم تحديد تركيز SDS-page لفصل البروتين
2- SDS - Page :
اسمها العلمي هو " Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS Page) "
وستنتقل البروتينات السالبه نحو القطب الموجب وسيتم تجزئتها حسب الوزن الجزيئي وهذه المرحله يتم فيها استخدام :
Sample , marker , stacking gel , resolving gel , running buffer https://t.co/navwYiwr8L