هل نقدر نستخدم تقنية PCR للكشف عن فيروس كورونا؟
نعم وتعتبر Standard method، تكون بنفس مفهوم إستخدام PCR لأي فيروس آخر،
تتم عن طريق تحويل RNA إلى DNA اللي هو بمسمى cDNA عن طريق Reverse transcriptase ويحصل مايسمى Reverse Transcription، ويعتبر RT-PCR https://t.co/wP0hiWe0ih
• العينات تكون في Universal swap ⬇️
وله أشكال متعددة، https://t.co/8U5e4MBtBO
• تمر بثلاث مراحل بجهاز PCR أو سواءً بالعمل اليدوي
1- RNA Extraction، يتم عزل RNA عن بقية المكونات الموجودة في العينة
2- Reverse Transcription تحويل RNA إلى cDNA
3- RT-PCR Amplification، يتم مضاعفة DNA https://t.co/RDdWWGakbD
تضاف ثلاث محاليل للعينة خلال عملية PCR
1- lysis buffer، يعزل viral RNA
2- Elution buffer، وبدوره نحصل على Pure RNA يكون خالي من البروتينات وأي مواد أخرى
3- Wash buffer يتخلص من أي رواسب تحتوي عليها العينة
4- قبل Amplification يتم إضافة Master Mix وهو محلول يحتوي على reverse transcriptase enzyme(RT) ومكونات PCR الأساسية الأخرى
Master Mix لابد إنه يكون في Positive room pressure، لمنع أي contamination